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人腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒
  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2017-02-27
  • 訪  問  量:857
簡要描述:

人腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本,靈敏度*。我們保證對所售任何產品一概負責到底,每一份實驗結果都真實可靠。讓你買得放心,用得舒心。

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產品詳情

本產品僅供科研實驗,不得用于醫(yī)療或食用

產品名稱:人腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒
產品英文名稱:Human Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA kit
產品規(guī)格:96T/48T
產品用途:科研實驗
保存條件:2-8℃
有效期:6個月

人腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒

BDNF是體內含量zui多的神經營養(yǎng)因子,它通過與TrkB(酪氨酸激酶 B)的結合而發(fā)揮作用。TrkB的胞內區(qū)域具有內在的酪氨酸激酶活性,BDNF與TrkB結合后激活胞內區(qū)域,引起TrkB自身磷酸化作用增強,進而激活Ras-MAPK通路,zui后在CAMP反應元件結合蛋白(CREB)的絲氨酸位點激活CREB。CREB通過增加BDNF基因及抗凋亡蛋白基因BCL-2的表達,來促進神經細胞生存,增加突觸可塑性及神經發(fā)生。作用方式具體如下:(1)增加突觸可塑性,進而影響長時程增強(long-term-ptentiati,nLTP),后者是學習過程和記憶形成(第二級記憶)過程的基礎。(2)促進神經發(fā)生尤其是海馬的神經發(fā)生,Ernfors等[5]發(fā)現(xiàn),BDNF基因敲除的雜合子小鼠,其神經病變的發(fā)生比野生型小鼠減少許多c.促進細胞生存的作用,主要體現(xiàn)在對各種神經元,尤其是對5-羥色胺(5-HT)和多巴胺(DA)能神經元的發(fā)育分化與生長再生具有維持和促進作用。

組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品(96μmol/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
48μmol/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
24μmol/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
12μmol/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
6μmol/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
3μmol/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,
然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此
重復5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止
液后15 分鐘以內進行。
人腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的
OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),
即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值
大于標準品孔*孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 個月
人腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒
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