ABTS二銨鹽是過氧化物酶的底物，常用于ELISA實(shí)驗(yàn)

ABTS作為底物在過氧化物酶的作用下產(chǎn)生可溶的綠色螯合物，該綠色產(chǎn)物吸收峰為405nm。該反應(yīng)可用1%SDS終止。相對于OPD或TMB底物，ABTS的顯色背景低很多。

ABTS二銨鹽也可用于總抗氧化能力檢測，ABTS作為顯色劑，檢測血漿、血清、唾液、尿液、細(xì)胞/組織裂解液、植物提取液、或各種抗氧化物（antioxidant)溶液的總抗氧化能力。

使用方法

第1步：7.4 mmol/L ABTS 0.2ml 和 2.6 mmol/L K2S2O8 0.2ml等比例混合，在室溫避光條件下室溫放置12小時(shí)。

第2步：用pH 7.4磷酸鹽緩沖液或無水乙醇、甲醇稀釋上述配制的溶液45倍至A734nm=0.7± 0.02。

第3步：取0.2ml 無水乙醇、0.2ml待測樣品，分別加入第2步配好的ABTS工作液0.8ml，渦旋輕微震蕩混勻10s，室溫靜止6min。對照無水乙醇A734nm檢測結(jié)果記為A0 ，樣品組記為A ，清除率=（A0-A）/A0*100%

標(biāo)準(zhǔn)曲線：稱取12.5 Trolox，定容至20ml，稀釋得到25~2500 umol/L濃度作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

相關(guān)溶液配制：

1，ABTS儲存液（7.4mmol/L，0.4ml）：取ABTS 3mg，加蒸餾水0.735ml。（分子量：548.68）。

2，K2S2O8儲存液（2.6mmol/L，1.43ml）：取K2S2O8 1mg，加蒸餾水1.43ml。（分子量：270.32）。

3，Trolox標(biāo)準(zhǔn)液（0.3mmol/L，9.6ml，0.1042mg/ml）：取Trolox 1mg，加蒸餾水9.6ml。（分子量：346.0）。