雙鏈DNA中和緩沖液操作方法

人體各組織、細(xì)胞代謝產(chǎn)生的CO2，主要通過血紅蛋白和氧合血紅蛋白的運(yùn)輸作用，被迅速運(yùn)到肺部排出，故幾乎不影響血漿的pH，當(dāng)產(chǎn)生比CO2酸性更強(qiáng)的酸（如磷酸、硫酸、乙酸等）時(shí)，血液中HCO3﹣/ CO2緩沖對便發(fā)揮緩沖作用，其中HCO3-可與代謝產(chǎn)生或外合產(chǎn)生CO2和H2O。增加的CO2大部分從肺部排出或通過血漿中蛋白質(zhì)緩沖對和與之作用，，使〔CO2〕降低；減少的HCO3﹣可通過腎臟進(jìn)行調(diào)節(jié)而得到補(bǔ)充，從而使〔HCO3﹣〕，〔CO2〕和〔HCO3﹣〕/〔CO2〕都恢復(fù)正常。當(dāng)人體新陳代謝過程中產(chǎn)生的堿進(jìn)入血液時(shí)，血液中的H3O+便立即與它結(jié)合生成水。H3O+的消耗有H2CO3的解離來補(bǔ)充，結(jié)果也使血液的pH 保持穩(wěn)定。

產(chǎn)品名稱：雙鏈DNA中和緩沖液

規(guī)格：100ml/500ml

保存：室溫

有效期：12個月

用途：又稱為中性轉(zhuǎn)移緩沖液,僅用于雙鏈DNA的雜交

說明：由Tris-HCl、氯化鈉組成，Ph7.4。

操作步驟(僅供參考):

1、 按實(shí)驗(yàn)具體要求操作。

2、或按如下步驟將凝膠置于變性溶液(堿性)中進(jìn)行DNA 變性:

①轉(zhuǎn)移到不帶電荷的膜上:a 、將凝膠置于10倍凝膠體積的雙鏈DNA 變性緩沖液中,室溫放置45min ,并不斷輕輕振蕩。b 、用去離子水短暫浸泡凝膠,然后將凝膠浸沒于10倍凝膠體積的DNA 中和緩沖液Ⅰ中,室溫放置30min ,并輕輕振蕩;更換一次DNA 中和緩沖液Ⅰ繼續(xù)浸泡15min 。

②轉(zhuǎn)移到帶電荷的尼龍膜上:a 、將凝膠置于5-10倍凝膠體積的DNA 中和緩沖液Ⅱ中,室溫放置15min ,并不斷輕輕振蕩。b 、更換一次DNA 中和緩沖液Ⅱ繼續(xù)浸泡20min ,并不斷輕輕振蕩。