乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理

測(cè)定原理
       
乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(choline acetyltransferase ChAT)的測(cè)定是以乙酰輔酶A和膽堿為底物,在ChAT的作用下,反應(yīng)的生成物和顯色劑結(jié)合,在324nm處測(cè)定吸光度,以此計(jì)算ChAT的活力。

樣本前處理:
 
10%勻漿液的制備:準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g):體積(ml)=1:9的比例,加入9倍體積的生理鹽水,2500轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,取上清液,再用生理鹽水2倍稀釋后測(cè)定。

測(cè)定意義:

乙酰膽堿Ach是調(diào)節(jié)食道平滑肌運(yùn)動(dòng)的主要的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)。食道平滑肌收縮主要是

由于Ach釋放引起。而乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(Choline acety1transferase ChAT)和乙酰膽堿脂酶

Acetycholinesterase ACHE)分別是Ach的合成酶和水解酶,調(diào)節(jié)Ach的代謝。食道組織

中這兩個(gè)酶的活力代表了食管內(nèi)源性膽堿能神經(jīng)功能狀態(tài)。

乙酰膽堿是延髓脊髓運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元,自主神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)節(jié)前纖維,神經(jīng)節(jié)后膽堿能（副交

感神經(jīng))纖維,以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)許多神經(jīng)元(例如基底節(jié),大腦運(yùn)動(dòng)區(qū)皮層)的主要神經(jīng)

遞質(zhì)。它是通過(guò)膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶的作用,由膽堿與來(lái)自線粒體的乙酰輔酶A所合成。在獲得

釋放后,乙酰膽堿刺激特殊的膽堿能受體,這種相互作用很快被局部的膽堿酯酶所終止,后

者使乙酰膽堿被水解為膽堿與乙酸鹽。乙酰膽堿的水平由膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶和膽堿的攝取所調(diào)

控。