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哺乳動物細胞培養(yǎng)基分為幾大類

更新時間:2020-09-18      瀏覽次數:1944

哺乳動物細胞培養(yǎng)基分為幾大類

哺乳動物細胞培養(yǎng)基是供哺乳動物細胞(包括原代細胞和細胞系)生長、增殖或者分化的人工配制的營養(yǎng)液,一般可分為天然培養(yǎng)基和人工合成培養(yǎng)基。

在20世紀早期,從事細胞培養(yǎng)用的培養(yǎng)液都是天然培養(yǎng)基,如用淋巴液和血漿等。到20世紀中期,隨著一些營養(yǎng)物質的化學合成和工業(yè)發(fā)展,細胞生物學家開發(fā)出人工合成的培養(yǎng)基配方。一開始即要尋找細胞生長低需要滿足哪些營養(yǎng)。后來隨著不同細胞的營養(yǎng)需求,又增加了其他的營養(yǎng)成分,但都是要配合牛血清(常用胎牛血清)一起使用。原因在于經典的合成培養(yǎng)基都不含蛋白質、脂類和生長因子以及其他某些必要的營養(yǎng)成分,因此需要胎牛血清來額外提供這些營養(yǎng)物質。通常胎牛血清的量是加5%-20%。

 

那么有哪些經典合成的培養(yǎng)基呢?有如下幾種:

1、BME(Basal Medium Eagle): 它是由美國生理學家Harry Eagle開發(fā)的基礎培養(yǎng)基。它初是根據Hela細胞和小鼠的成纖維L細胞所需的低營養(yǎng)而設計的。它包含無機鹽、氨基酸和維生素等。后來許多培養(yǎng)基在它基礎上設計而成。

2、MEM(Minimum Essential Medium Eagle): MEM培養(yǎng)基也是Harry Eagle在BME配方基礎上改良而成。它比BME含有更高濃度的氨基酸,可同時用于貼壁細胞和懸浮細胞,例如HeLa、BHK-21、293、MCF-7細胞等。

3、DMEM:即意大利生理學家Dulbecco改良的Engle培養(yǎng)基。DMEM常用,能支持很多貼壁細胞生長,包括原代的成纖維細胞、神經元、HUVECs、平滑肌細胞以及一些細胞系如Hela(常用于癌癥和信號轉導研究)、293(常用于外源蛋白表達)、Cos-7(常用于轉染研究)等。

4、GMEM(Glasgow's Minimum Essential Medium):是對BME培養(yǎng)基的改良型,添加有10%的胰蛋白?磷酸鹽以及2倍濃度的氨基酸和維生素,適合培養(yǎng)BHK細胞等。

5、MEMα:是MEM培養(yǎng)基的改良型,包括非必需氨基酸、丙酮酸鈉、硫辛酸、維生素B12、生物素和抗壞血酸??勺鳛镈G44和其他DHFR陰性細胞的選擇培養(yǎng)基。也可用于培養(yǎng)角質細胞、原代大鼠星形細胞和人黑色素瘤細胞。

6、DMEM/F12: 它將 DMEM 的高濃度葡萄糖、氨基酸及維生素與 F-12的廣泛組分結合在一起,營養(yǎng)更豐富,可用于支持很多種類的哺乳動物細胞生長,包括 MDCK、膠質細胞、成纖維細胞、人內皮細胞及小鼠成纖維細胞。

7、RPMI-1640:主要用于培養(yǎng)懸浮細胞。它含有還原劑谷胱甘肽和高濃度維生素(如肌醇、膽堿),還包括生物素、維生素B12等MEM、DMEM沒有包含的成分。

8、M199:1950年由Morgan, Morton和Parker開發(fā)而成,用于原代雞胚成纖維細胞的營養(yǎng)研究?,F在常用于非轉化細胞和原代移植上皮細胞的培養(yǎng)以及疫苗和病毒的生物試劑。

9、IMDM(Iscove's Modified Dulbecco's Medium):是DMEM的改良型,添加有硒、氨基酸和維生素,但缺乏鐵。用于快速生長的高密度細胞,例如 Jurkat, COS-7和巨噬細胞。

10、Leibovitz's L-15:用于培養(yǎng)無CO2環(huán)境的細胞。原先的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)被游離堿性氨基酸、磷酸鹽和高濃度的半乳糖和丙酮酸鈉所替代。無須經常更換培養(yǎng)基。常用于病毒學診斷等密閉培養(yǎng)細胞的場合。

11、McCoy's 5A:由Thomas McCoy早開發(fā)該配方。包含有谷胱甘肽、蛋白胨和高濃度葡萄糖。常用于培養(yǎng)來自正常骨髓,皮膚,牙齦、小鼠腎,網膜,腎上腺,肺,脾,大鼠胚胎等的原代細胞。

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