糖原檢測試劑盒樣本處理方法

一、測定原理：
 
糖原在濃硫酸的作用下可脫水生成糖醛衍生物，后者再與蒽酮作用形成藍色化合物，與同法處理的標準葡萄糖溶液比色定量。糖原在濃堿溶液中非常穩(wěn)定，故在顯色之前先將組織放入濃堿中加熱以破壞其它成分而保留糖原。

樣本前處理：
1.取樣：取新鮮肝臟或肌肉樣本生理鹽水漂洗后，濾紙吸干，稱重（樣本重量≤100mg 為宜）。

2.水解：按樣本重量（mg）：堿液體積（μl）=1：3，一起加入試管，沸水浴煮 20min，流水冷卻。

例如：肝臟組織稱重 75mg 按重量體積比 1：3 應加入試劑 A 的量為 225μl；肌肉組織稱重 85mg 按重量體積比 1：3 應加入試劑 A 的量為 255μl

*注：煮前用冰箱保鮮膜將管口扎起，以防水分蒸發(fā)。然后在膜上用針頭扎一小孔，以便氣體熱脹冷縮。

3.將糖原水解液進一步制備糖原檢測液：
肝糖原檢測液為 1%，加蒸餾水的量為：肝臟重量×100-肝臟重量×4*=肝臟重量×96
肌糖原檢測液為 5%，加蒸餾水的量為：肌肉重量×20-肌肉重量×4*=肌肉重量×16

注：4*為水解時堿液與組織的體積數(shù)。
例如上例：制備 1%肝糖原檢測液，加蒸餾水的量為：75×96=7200μl=7.2ml；
制備 5%肌糖原檢測液，加蒸餾水的量為：85×16=1360μl=1.36ml。

脂肪肝樣本糖原測定
一、樣本前處理：
取樣：取新鮮肝臟樣本用生理鹽水漂洗后，濾紙吸干，稱重（樣本重量≤100mg 為宜，不要＞100mg）。
2、水解：按樣本重量（mg）：堿液體積（μl）=1：3，一起加入試管，沸水浴煮20min，流水冷卻。
   注：在煮前用冰箱保鮮膜將管口扎起，以防水分蒸發(fā)。然后在膜上用針頭扎一小孔，以便氣體熱脹冷縮。
3、將糖原水解液進一步制備糖原檢測液：
  肝糖原檢測液為5%，加雙蒸水的量為：肝臟重量×20-肝臟重量×4*=肝臟重量×16
  注：4*為水解時堿液與組織的體積數(shù)。
4、檢測液除脂：取上述制備好的檢測液（一般可見檢測液上層漂浮有乳白色油狀物），加入一定量的lv仿，可按照檢測液量（ml）：lv仿（ml）=4:1，漩渦混勻，3500轉/分鐘離心10分鐘，取上清用于測定（如含量較高，需稀釋后再測定）

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