酵母氮源培養(yǎng)基使用注意事項(xiàng)

培養(yǎng)基（Medium）是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有水、氮源、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）、碳源、生長(zhǎng)因子（維生素、氨基酸、堿基、抗菌素、色素、激素和血清等）等。

Yeast Nitrogen Base ( YNB)即酵母氮源基礎(chǔ)，由氮源、微量元素、維生素及無(wú)機(jī)鹽等復(fù)配而成，主要為酵母菌（包括釀酒酵母菌和畢赤酵母菌）培養(yǎng)提供無(wú)氨基氮源和生長(zhǎng)因子。主要用于配制營(yíng)養(yǎng)缺陷型篩選培養(yǎng)基和表達(dá)培養(yǎng)基，用于酵母菌的營(yíng)養(yǎng)缺陷型篩選培養(yǎng)和表達(dá)培養(yǎng)，如配制SD篩選培養(yǎng)基、RD培養(yǎng)基、MD培養(yǎng)基、MM培養(yǎng)基、MG培養(yǎng)基等。

配制方法：

（一）單獨(dú)配制YNB

1.稱取6.7 g YNB加純水至1 L，攪拌溶解，為1×YNB溶液，溶液澄清呈無(wú)色至淡黃色，常溫pH 5.4±0.2@25℃；

2.稱取67 g YNB加純水至1 L，攪拌溶解，為10×YNB溶液，溶液澄清呈黃色。

（二）配制培養(yǎng)基

1. 稱取6.7 g YNB（畢赤酵母一般為13.4 g/L），以及相應(yīng)量的碳源、氨基酸、瓊脂或其它補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)成分，混勻，pH調(diào)至所需（多為5.8），121℃高壓滅菌15分鐘。

2. 也可配制10×YNB溶液，0.2 μm孔徑濾器過(guò)濾除菌，以保證生物-素在內(nèi)有機(jī)物避免高壓滅菌遭到破壞，培養(yǎng)基的其它成分（預(yù)調(diào)pH值）高壓滅菌后冷卻至60 ℃加入10×YNB溶液。

注意事項(xiàng)：

1.YNB成分比較復(fù)雜，多為易吸潮的鹽分，稱取完后已及時(shí)旋緊瓶蓋，并置于干燥避光處儲(chǔ)存。嚴(yán)重結(jié)塊后應(yīng)廢棄不再使用。

2.YNB（PM2070）配制10×溶液，溶解速度較慢，如需加快溶解速度，可加入適量鹽酸加快溶解，待*溶解后，再用氫氧化鈉調(diào)至合適pH值。

培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培養(yǎng)基），較長(zhǎng)時(shí)間的貯存，必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長(zhǎng)期保管，均改制成粉末。